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冻存袋的原理

细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或DMSO作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。

冻存袋介绍

细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。连续培养的细胞系容易发生遗传漂变，有限细胞系终会发生***，所有培养的细胞都易受到微生物污染。已建立的细胞系是一种宝贵资源，更换细胞系成本高昂，而且耗费时间。可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。

细胞冻存步骤

（1）将标本编号，并用Marker笔仔细标注于冻存管管盖及管壁上，同时将每管编号、内容物、取材日期记录于登记本上。

（2）将冻存管装入冻存袋，戴上棉线手套和防护面罩，迅速放入液氮罐中30～60秒速冻，至冻存***完全冻住，取出待液氮完全挥发（注意动作轻柔，避免液氮溅洒）。

（3）将经液氮速冻后的***放入-80℃冰箱相应编号盒中，长期保存。

（4）取材完毕后，将剩余新鲜标本浸泡于10%中尔马林液中固定（切记不要拿错病理号），做好和当日冰冻值班医生的交接，避免遗漏。

（5）清洗取材台及取材器具，器具需用消毒液完全浸泡10～15min，清水冲洗后擦干置于干燥处保存备用，取材器具应定期高温消毒。